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大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書如下:
實(shí)驗(yàn)原理?
本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量。首先用純化的大鼠T3抗體包被微孔板,形成固相抗體。隨后依次加入待測(cè)樣本中的T3和HRP標(biāo)記的T3抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。洗滌后加入底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺與樣品中的T3濃度呈正相關(guān),通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中T3的濃度?。
BS-3457 大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T
試劑盒組成?
30倍濃縮洗滌液?:20ml×1瓶
酶標(biāo)試劑?:6ml×1瓶
酶標(biāo)包被板?:1塊(96孔)
標(biāo)準(zhǔn)品(240ng/ml)?:1瓶
顯色液A?:1瓶
顯色液B?:1瓶
終止液?:6ml×1瓶
說(shuō)明書?:1份?。
實(shí)驗(yàn)步驟?
樣本準(zhǔn)備?:將大鼠血清或血漿樣本離心后取上清液,避免溶血或脂血?。
加樣?:依次向包被板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測(cè)樣本,每孔50μL?。
孵育?:37℃孵育30分鐘,洗滌5次?。
加酶標(biāo)試劑?:每孔加入50μL HRP標(biāo)記的T3抗體,37℃孵育30分鐘,洗滌5次?。
顯色?:每孔加入50μL顯色液A和50μL顯色液B,避光反應(yīng)15分鐘?。
終止反應(yīng)?:每孔加入50μL終止液,輕輕混勻?。
測(cè)定?:使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔OD值?。
結(jié)果計(jì)算?
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?:以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。
計(jì)算樣本濃度?:根據(jù)樣本OD值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得對(duì)應(yīng)的T3濃度?。
注意事項(xiàng)?
試劑保存?:未開封試劑盒保存于2-8℃,開封后酶標(biāo)板需密封保存于-20℃?。
操作規(guī)范?:避免交叉污染,使用一次性吸頭,洗滌?。
樣本處理?:避免反復(fù)凍融樣本,確保樣本新鮮?。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境?:保持實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度穩(wěn)定,避免強(qiáng)光直射?。
適用范圍?
本試劑盒適用于定量測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量,用于甲狀腺功能相關(guān)研究?。
技術(shù)參數(shù)?
檢測(cè)范圍?:4ng/ml-120ng/ml?。
檢測(cè)限?:47.4pg/mL?。
保質(zhì)期?:12個(gè)月?。
以上為大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒的詳細(xì)使用說(shuō)明,實(shí)驗(yàn)操作需嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性?。
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